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新品上市丨Bioss助您解決“膠”慮 WB條帶更加清晰
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2023-5-16


“梯度膠的各種試劑濃度讓人頭暈眼花;一次配四塊膠,手忙腳亂一上午時間就過完了;

可以保溫杯里泡枸杞,卻拯救不了配膠試劑影響身體;

辛辛苦苦制完膠,怎么又出現漏膠/凝膠太慢/膠孔殘缺,今天又要加班了;

條帶歪歪扭扭,難入導師法眼,唉,又要重新來過。”這是不是也是你在做WB時的感嘆?

快來看看Bioss全新推出的Precast Gels (Bis-Tris, MOPS)蛋白預制膠Bioss助您解決“膠”慮,讓WB條帶更加清晰。


產品信息:

    本產品為Bis-Tris聚丙烯酰胺電泳預制凝膠,可用于蛋白質分離實驗,單片膠為15孔,每孔最大上樣量為25 μl推薦上樣量10-15 μl。獨特的凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩定性,并避免蛋白在電泳過程中的再修飾。(注:電泳推薦使用配套贈送的MOPS running buffer,對于小分子量蛋白,也可使用MES緩沖液。請勿使用Tris-Glycine Running Buffer代替,電泳緩沖液反復使用次數建議不超過3次)


預制膠選擇指南

在蛋白實驗中,通常使用固定濃度膠梯度膠兩種,與固定濃度膠相比,顯然梯度膠具有更大優勢。首先,梯度膠的分離范圍更寬,可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質。梯度膠的頂部孔徑較大,底部孔徑較小分子量較大的蛋白質可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離,同時分子量較小的蛋白質可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離。

另一個優點是梯度膠可以分辨分子量相差較小,在固定濃度膠中不能分辨的蛋白質。電泳過程中,蛋白質在梯度膠中遷移,經過的孔徑越來越小,直到凝膠的孔徑不能通透,這樣電泳過程中蛋白質就被濃縮,集中在一個很窄的區帶中。而分子量略小的蛋白質可以遷移得更靠前一些,被集中在略前面的區帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小,在蛋白質不能通透的孔徑附近對蛋白有濃縮作用,所以電泳后形成很窄的區帶,可以分辨出分子量相差較小的蛋白質。

在蛋白分離范圍相同的情況下,梯度膠的選擇主要取決于目的蛋白的大小,雖然都可以分離10-250 kD的蛋白,但濃度為4-12%的梯度膠對55 kD以上的蛋白分離效果更好,而濃度為4-20%的梯度膠則更利于分離55 kD以下的蛋白。

凝膠分離范圍


產品優勢及常見問題解答

 產品優勢:

1.方便:即開即用,無需配制溶液和灌膠操作,附送足量的電泳緩沖液,簡化操作步驟,縮短實驗時間,每天都有新結果;

2.快捷:電泳時間短,在150V電壓下,電泳40-50分鐘即可完成,再也不用熬夜做WB啦;

3.安全:無需接觸有毒、刺激性試劑,和屏住呼吸加試劑say byebye;

4.兼容性強:兼容目前市場各種電泳槽,無論是BIORAD,天能還是君意東方,通通百搭;

5.應用廣泛:SDS變性及非變性電泳一膠搞定;

6.重復性好:通過全自動、大規模的凝膠灌注技術,品質穩定,保證每片膠之間良好的重復性,重復實驗補數據也不怕;

7.結果清晰:獨特的凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩定性并避免蛋白在電泳過程中的再修飾。條帶平整、清晰、銳利,無邊緣效應,讓你的WB結果張張精品。


 常見問題解答:

1.指示劑偏斜

可能原因:電泳槽漏液

解決辦法:調整膠板位置,檢查密封條。

2.蛋白條帶拖尾

可能原因:樣品溶解不佳或者降解

解決辦法:樣品加熱,離心取上清或重新制備新鮮樣品

3.指示劑呈倒三角狀,即兩邊低、中間高,形成峰頂

可能原因:內、外槽電泳液量不夠

解決辦法:補滿內槽電泳液,外槽電泳液補至2/3高度

4.指示劑出現弧度

可能原因:底部出口被電泳槽上膠條部分覆蓋或者膠板底部沒卡緊

解決辦法:調整膠板位置,避免底部出口和膠條重合

5.上半部分蛋白條帶無端消失

可能原因:內槽或樣品被蛋白酶污染

解決辦法:清洗實驗相關試劑、儀器,避免被蛋白酶污染。

6.WB曝光圖蛋白條帶不完整

可能原因:濕轉時海綿里面有氣泡沒有排干凈或者夾子沒夾緊

解決辦法:將海綿里面的氣泡排干凈;調整夾子的位置。

7.樣品條帶在凝膠中擴散狀

可能原因:樣品含鹽類過多

解決辦法:采用透析或者超濾除鹽。


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